로타 바이러스 감염

독감

로타 바이러스 감염 또는 장 / 위장 독감은 증상이있는 전염병입니다. 로타 바이러스 감염은 어린이에게서 가장 흔합니다.

로타 바이러스 감염은 대부분의 감염이이 특정 집단에서 발생하기 때문에 어린이에게 특별한 위험을 초래합니다.

로타 바이러스 감염의 원인균

이 감염은 로타 바이러스 (Reoviridae)의 바이러스 인 로타 바이러스 (rotavirus)에 의해 발생하며, 이는 항원 구성에서 서로 비슷합니다.

감염원

감염의 원인은 아픈 사람입니다. 감염의 전염성 측면에서 가장 위험한 것은 로타 바이러스 감염의 처음 3 ~ 5 일 동안의 환자입니다.이 기간 동안 배설물의 바이러스 함량이 가장 높기 때문입니다.

전달 메커니즘

바이러스를 전염시키는 주된 메커니즘은 대개 덜 구강 (fecal-oral)인데, 이는 감염된 개체가있는 로타 바이러스 전염 경로를 통한 접촉 전파 경로입니다. 특히 유제품이 위험합니다. 저온은 대개 바이러스를 파괴하지 않으므로 식품을 냉장고에 보관해도 로터 바이러스 감염의 발병을 예방할 수는 없습니다.

유행성 로터 바이러스 감염 기간

질병의 발생은 가을 겨울 기간에 발생하지만, 다른 계절에는 질병의 발생이있을 수 있습니다. 일반적으로 로타 바이러스 감염의 특징적인 증상의 확산과 발생은 독감 유행의 출현과 동반되며, 따라서 사람들은 "장 독감"으로 더 일반적으로 알려진 로타 바이러스에 감염됩니다.

병인

인체에 들어간 후 바이러스는 소장의 점액 세포로 들어가서 장의 융모를 파괴합니다. 장내 점막의 분비 기능을 침범하는 것뿐만 아니라 특정 효소의 합성은 많은 양의 전해질과 장 내강으로 유입되는 물 때문에 심한 설사와 탈수를 초래합니다.

로타 바이러스 감염의 증상 :

  • 비강 혼잡;
  • 인후염;
  • 기침;
  • 복통;
  • 메스꺼움, 구토, 설사;
  • 두통, 발열.

진료소 :

로타 바이러스 감염의 주요 기간 :

  • 잠복기는 1-2 일간 지속됩니다.
  • 급성 기간은 3-7 일 지속;
  • 회복은 4-5 일간 지속됩니다.

이 질환은 급성 발병이 특징이지만, 전구 기간의 존재가 가능합니다 (약 2 일). 성기능 저하, 전반적인 약화, 두통, 피로감 증가, 식욕 부진, 불쾌한 감각 상실 및 위장 울림이 발생할 수 있습니다. 또한, 비강 울혈, 인후통, 쉽게 기침 등 상부 호흡기 부분에 질병의 발현이 가능합니다.

전반적인 임상 결과에는 중독, 위장염 및 상부 호흡기 병변의 증후가 포함됩니다.

위장염 증후군의 징후로는 복부의 큰 소리, 복부의 가장 위 통증, 오심, 구토, 설사 등이 있습니다. 로타 바이러스에 감염된 설사는 거품이 일고 물기가 있으며 노란색 또는 녹색 황색입니다.

중독 증후군의 징후 : 피로, 약점, 두통. 심한 경우 : 현기증, 졸도.

위 호흡 기관의 패배는 콧물, 코 막힘, 인후통, 기침이 특징입니다. 그것이 밝은 붉은 색을 가지고있을 때 Zev.

합병증과 사망률

중증 탈수증이 동반되는 심한 형태의 질환은 심혈관 질환의 발병, 사망 (경우의 2-3 %)이 특징입니다. 감염 후 불안정한 면역이 생겨 시간이 지남에 따라 약해 지므로 재감염이 가능합니다.

로타 바이러스 감염 진단

로타 바이러스 감염의 진단은 PCR - 중합 효소 연쇄 반응, RPHA - 수동 적혈구 응집 반응, CSC - 보체 결합, 면역 형광 등의 실험실 진단 방법을 사용하여 인간에서 로타 바이러스가 검출되는 경우에만 가능합니다.

완전한 혈액 수치는 호중구가 왼쪽으로 이동하면서 급성기에 ESR이 증가 된 백혈구 증가증을 나타냅니다. 회복 기간 동안 혈액 사진의 정상화가 특징입니다. 소변 검사는 단백질, 백혈구 및 적혈구, 유리 실린더를 소량으로 보일 것입니다.

로타 바이러스 감염 - 성인 및 어린이의 장 독감 치료

치료법은 증상이 있습니다. 로타 바이러스 퇴치를위한 특정 항 바이러스제가 없기 때문입니다.

로타 바이러스 감염의 치료 원리 :

  1. 로타 바이러스 감염 환자의 격리
  2. 탈수와의 전쟁. 예를 들어 rehydron, 염분과 같은 특별한 염 용액을 사용하는 것이 바람직합니다. 그들은 병원에서 환자의 치료에 사용되지만, 산의 정상적인 산성 상태를 회복시키는 염분은 집에서 준비 할 수 있습니다. 1 티스푼 ~ 1 리터의 물. 풍부한 미네랄 워터를 마시는 것이 좋습니다.
  3. 온도와의 싸움은 38, 5 및 그 이상의 온도에서 시작해야합니다. 동시에, 열의 유형에 따라 온도를 낮추기위한 신체적 방법을 사용해야합니다. 예를 들어 물로 몸을 문지르는 것과 화학 물질 - 특정 약을 복용하는 것, 어린이에게는 양초를 사용하는 것이 낫습니다.
  4. 효소 제제, 흡착제 및 수렴제 (활성탄, 폴리 솔브), 유산 세균 제제의 승인.
  5. 복부의 통증을 진통제를 먹는 것은 금지되어 있습니다.

로타 바이러스 감염에 대한 병원 진료에 대한 적응증 :

  • 진행성 악화, 연장 된 설사;
  • 새로운 증상의 출현.

로타 바이러스 감염에 대한 다이어트 :

다이어트에는 낙농 제품을 포함한 우유 및 유제품을 피하는 것이 포함됩니다. 식이 요법을하는 닭 국물이나 쌀죽을 기름을 추가하지 않고 물에 삶아 두는 것이 좋습니다. 작은 부분에서 휴식을 취하는 것이 필요합니다. 탄수화물이 풍부한 음식 섭취를 제한하는 것이 좋습니다.

로타 바이러스 감염 예방

로타 바이러스 감염에 대한 주요 예방 조치는 다음과 같습니다.

  • 질병에 걸린 일상적인 손씻기, 입증 된 고품질의 제품을 먹는 것, 증류수를 사용하는 것, 야채와 과일을 씻는 것 등을 포함하여 바이러스가 몸에 들어가는 것을 방지합니다.
  • 상점 및 시장에서의 음식 시설 및 제품의 위생 관리.

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로타 바이러스 감염

로타 바이러스 감염 (로타 바이러스 위장염)은 로타 바이러스에 의한 급성 전염병으로 일반적인 중독 증상과 위장염의 진행으로 위장관 손상을 특징으로합니다.

ICD-10 코드
A08.0. 로타 바이러스 장염.

로타 바이러스 감염의 병인 (원인)

원인 병원체는 로타 바이러스 (rotavirus) (로타 바이러스) 계열 인 Reoviridae 계통의 구성원이다. 이 이름은 로타 바이러스와 바퀴가있는 형태학적인 유사성 (라틴어 "로타"- "바퀴")을 기반으로합니다. 전자 현미경에서 바이러스 입자는 넓은 허브, 짧은 쐐기 및 명확하게 정의 된 얇은 테두리가있는 바퀴처럼 보입니다. 65-75nm의 직경을 갖는 로타 바이러스 비리 온은 전자 밀도가 높은 중심 (코어)과 2 개의 펩타이드 껍질 (외측 및 내측 캡시드)로 구성된다. 38-40 nm 코어는 내부 단백질과 이중 가닥 RNA가 나타내는 유전 물질을 포함합니다. 인간과 동물에서의 로타 바이러스의 게놈은 11 개의 단편으로 구성되며, 이는 아마도 로타 바이러스의 항원 다양성의 원인 일 것입니다. 인체에서의 로타 바이러스 복제는 소장의 상피 세포에서만 일어난다.

로타 바이러스 감염, 전자 현미경으로보기

로타 바이러스에서 4 가지 주요 항원이 발견되었습니다. 주요한 것은 그룹 항원, 내부 캡시드의 단백질이다. 모든 그룹 특이 항원을 고려하여, 로타 바이러스는 A, B, C, D, E, F, G의 7 가지 그룹으로 분류됩니다. 대부분의 인간 및 동물 로타 바이러스는 A 그룹에 속하며 하위 그룹 (I 및 II)과 혈청 형이 구분됩니다. 하위 그룹 II는 환자로부터 격리 된 균주의 70-80 %까지 포함합니다. 특정 혈청 형과 설사의 중증도와의 상관 관계가 있다는 증거가 있습니다.

로타 바이러스는 식수, 수역 및 폐수에서 환경 적 요인에 강합니다. 야채는 25-30 일, 양모는 15-45 일 동안 지속됩니다. 로타 바이러스는 용액, 에테르, 클로로포름, 초음파 소독 작용으로 반복 된 동결에 의해 파괴되지 않지만 10 일 또는 2 시간 미만의 pH를 갖는 용액으로 처리하면 삶습니다. 바이러스에 대한 최적 조건 : 온도 4 ° C 이상 (> 90 %) 또는 낮은 (작성자 : 전염병 : 국가 지도력, ND Yuschuk, Yu. Y. Vengerov 편집. 2009)

로타 바이러스 감염의 진단

긍정
차관
수석 역학
소련 보건부
G.G.NONISHCHENKO

1989 년 3 월 7 일 N 15-6 / 6

로타 바이러스 감염

(방법 권장 사항)

소련 사회 과학원 소아마비 및 바이러스 성 뇌염 연구소

소련 보건 복지부 전염병 연구소;

역학 및 미생물학 연구소. G.N. Gabrievskogo RSFSR 보건부;

과학적 생산 협회 "Rostepidkompleks";

소련 보건 당국의 소독 및 살균에 관한 All-Union Scientific 연구소.

지침은 보건 당국 및 기관의 종사자 및 연구자를 대상으로합니다.

인간 로타 바이러스는 비슷한 동물 바이러스 그룹에 속하며, 네브라스카 종아리 설사 바이러스 (NCDV), 어린 생쥐의 방역 설사 바이러스 (EDJM), 원숭이 바이러스 (SA-II), 양의 장 내용물에서 유래 된 바이러스 가축 (0), 설사 돼지, 새끼, 강아지 및 기타 동물의 병원균이 포함됩니다. 이 모든 바이러스는 크기와 모양이 동일하며 항원 성 측면에서 서로 가깝습니다.

로타 바이러스 동물은 조직 배양에서 잘 번식하여 인체 로타 바이러스 전에 분리되고 연구되었습니다. 인간 로타 바이러스에 대한 항원 근접성으로 인해 송아지와 원숭이의 로타 바이러스는 급성 위장염에서 병인학적인 역할을하기 위해 사용되었으며, 혈청 학적 진단 및 면역 반응을 얻기 위해 사용되어왔다.

인간의 로타 바이러스는 십이지장 상피 세포 및 전형적인 환자의 대변의 추출물에서 전자 현미경으로 검출되었는데, 매우 중요한 농도 (대변 1.0g 당 최대 10 개의 입자)에 종종 함유되어 있습니다. Rotavirus virion은 직경이 70 - 75 nm이고 리보 핵산 -RNA (11 개의 이중 가닥 세그먼트)를 포함하는 2 캡시드 (즉, 2 층 단백질 외장으로 코팅 된) 구형 입자로 염화 세슘에서 1.36 g / cu의 부유 밀도를가집니다. cm (침강 계수 500 - 530 S)

이용 가능한 특성에 따라, 인간 로타 바이러스는 위에 열거 된 동물 바이러스와 함께, Reoviridae 계열의 로타 바이러스 속으로 분류되었다. "로타 바이러스"라는 이름은 전자 현미경으로 바이러스의 입자가 닮은 바퀴 인 라틴어 로타 (rota)에서 파생 된 것입니다.

ELISA에 의해 검출 된 항원 특이성에 따라, 로타 바이러스는 중화 반응에서 검출 된 특이성에 의해 4 개의 (그리고 더 많은) 혈청 형 (아라비아 숫자 -1로 표시됨)에 의해 2 개의 하위 그룹 (로마 숫자 I 및 ​​II로 표시) 2, 3, 4). 특정 로타 바이러스의 하위 그룹 특이성은 내부 캡시드의 주요 단백질에 의해 결정되며, 이들의 혈청 형 특이성은 외부 캡시드의 당 단백질에 의해 결정된다. 그룹 특이 항원이없는 새로운 유형의 로타 바이러스 (소위 파라 로타 바이러스)가 최근 발견되었습니다.

로타 바이러스 감염이 널리 퍼져 있습니다. ID에 관한 정보는 호주, 영국, 동독, 캐나다, 인도, 스페인, 미국, 프랑스, ​​일본 및 기타 많은 국가에서 발간되었습니다. 소련에서는 로타 바이러스 위장염의 질병이 RSFSR, Transcaucasia, 우크라이나, 발트 제국, 중앙 아시아 및 기타 영토의 여러 지역에서 어린이와 성인 사이에 등록되었습니다. 어린이와 성인의 경우 로타 바이러스 감염은 산발적 인 경우, 지역 집단 질병 및 대규모 집단의 다양한 인구 집단의 집단 발생으로 나타날 수 있습니다. 급성 장 감염이있는 입원 환자 중 로타 바이러스 위장염이있는 성인의 비율은 평균 10-15 %, 어린이는 15-27 % 이상입니다. 건강한 어린이와 성인에서의 로타 바이러스 (항원) 분리에 관한 문헌 데이터는 매우 모순적입니다 : 0-0.5 % - 소아는 42 %, 성인은 0 % ~ 7 % 이상. 로타 바이러스 감염은 일년 내내 기록됩니다. 그러나 추운 계절에는 70 % 이상의 환자가 발견됩니다. 겨울과 봄 기간에는 신생아와 조산아, 조직화 된 어린이들, 노인들 사이의 집단 질병뿐만 아니라 인구 중 로타 바이러스 감염의 대다수가 기록됩니다. 성별에 따른 로타 바이러스 감염 (어린이와 성인 모두)의 분포에는 현저한 차이가 없었습니다.

로타 바이러스 병인의 급성 장 감염에 대한 감염원은 감염된 성인과 어린이 - 감염이 명백하거나 대변이있는 로타 바이러스를 무증상으로 분비하는 환자입니다. 동시에, 로타 바이러스에 감염된 어머니와 조직 된 아동 그룹의 아이들로부터 노인들과 성인들에게 첫해의 어린이들이 종종 감염됩니다. 동물의 감염은 입증되지는 않지만 그것이 배제되지는 않습니다. 현재, 서로 다른 혈청 형의 로타 바이러스는 거의 50 종의 동물과 새들의 배설물에서 발견되며, 설사 증상이 있거나없는 경우입니다.

질병의 임상 양상이없는 환자 및 사람의 로타 바이러스는 현재 대변에서만 발견됩니다. 환자들은 질병의 첫날부터 rotaviruses를 분비하는 반면, 모든 환자에서 대변에서 병원균의 최대량 (1g 당 10-10 바이러스 입자까지)이 질병의 처음 5 일 동안 검출되어 다른 사람에게 환자의 가장 큰 역학적 위험을 결정합니다 이 병의 기간. 앞으로 6 ~ 10 일 동안 대변이 정상화되면 환자 대소변에 의한 로타 바이러스 방출이 급격히 감소합니다. 환자에 의한 로타 바이러스의 평균 배설 기간은 7-8 일이지만 일부 환자의 경우이 기간은 20-30 일까지 지속될 수 있습니다. 질병의 임상 적 증상이없는 사람은 대변이있는 로타 바이러스의 장기간 방출 (최대 수 개월 또는 그 이상)을 관찰 할 수 있습니다 (관찰 기간).

로타 바이러스 전파의 주요 메커니즘은 물, 음식 및 국내 전송 경로에 의해 실현되는 분변 구강입니다. 산발성 및 국소 그룹 질병의 경우, 로타 바이러스 감염은 주로 가정에서 발생합니다. 이것은 로타 바이러스 (10 바이러스 입자 이내)의 매우 낮은 병원성 복용량에 기여합니다. 다양한 환경 사이트에서 로타 바이러스는 온도 및 습도에 따라 10-15 일에서 1 개월까지 생존력을 유지한다는 것이 입증되었습니다. 대변에서 몇 주에서 7 달까지.

현재 로타 바이러스 감염의 물 및 식량 감염은 국내 및 해외에서 기록됩니다. 로타 바이러스는 강, 호수, 바다, 지하수, 수돗물, 특정 식품 (우유 등)의 물에서 발견됩니다.

어떤 경우에는 로타 바이러스의 물방울, 먼지 및 다른 경로의 구현 가능성이 예상됩니다.

로타 바이러스는 급성 위장염의 병원 내 (병원 내) 발병에서 주요 원인균 중 하나로 알려져 있습니다. 다른 프로필의 병원에서는 아픈 어린이의 50-60 %가 감염 될 수 있습니다. 출산 가정에서는 발병 사례가 있습니다. 인공 수유, 급성 및 만성 질환으로 고통받는 어린이, 면역 결핍증의 다양한 유형에 종종 영향을 미칩니다.

감수성 내성. 모든 연령 그룹의 사람들은 로타 바이러스에 감염되기 쉽습니다. 가장 큰 감수성은 6 세 어린이에게서 관찰됩니다. 최대 2 년. 로타 바이러스에 대한 항체는 생후 첫해에 50-60 %의 어린이에게서 발견되며 3 세 이상 - 거의 모든 성인에서 90 % 이상이 검출됩니다. 그러나 문헌에 따르면 혈청에 항체가 존재한다는 것은 체액 성 항체가 유의 수준이라 할지라도 반복적 인 질병이 가능하기 때문에 기본적으로 로타 바이러스 만있는 인체 회의 일 뿐이며 면역력은 존재하지 않는다는 것을 나타냅니다. 로타 바이러스 감염에 대한 내성은 완전히 이해되지 않았습니다. 감염에 대한 내성은 주로 IgA 클래스의 분비 항체의 존재와 관련된 소장 상피 세포의 국소 면역으로 인한 것으로 여겨진다. 이 항체는 간호 어머니의 젖에서도 발견되며, 배설물과 함께 임상 증상이없는 신생아의 수동 면역화의 요인으로 작용하여 상당량의 로타 바이러스를 환경으로 방출하고 미숙아 및 전염성이없는 어린이를 감염시킬 수 있습니다. 다른 혈청 형의 로타 바이러스는 교차 면역을 일으키지 않으므로 다른 어린이의 혈청 형 때문에 동일한 어린이 또는 성인이 질병을 반복했을 수 있습니다. 로타 바이러스 위장염 환자에서 면역의 불안정한 본성이 또한 지적되며 반복 된 질병은 감염 후 1 ~ 1.5 년 후에 종종 기록됩니다.

로타 바이러스 감염에 의한 전염병 과정의 특징 :

- 영토 분배의 편재성;

- 심한 겨울 또는 겨울 - 봄 계절성;

- 조직화 된 그룹에서 병원체의 낮은 전염병과 높은 집중력;

- 모든 연령 집단의 사람에 대한 피해;

- 생후 하반기 어린이의 질병을 최대한으로 탐지 한 2 세 미만의 어린이 중 높은 비율의 사례.

- 높은 물 활동과 국내 전송 경로;

- 주로 가정에만 국한된 집 초점의 지역성;

- 어린이와 성인의 로타 바이러스의 무증상 격리 가능성;

- 의료 인력 및 아픈 어린이의 부모의 참여로 병원 감염의 가능성.

로타 바이러스 감염의 임상상은 다른 병인의 급성 장 질환의 임상 양상과 많은 공통점이있어이 병을 진단하기가 어렵습니다. 그러나,이 질병을 적시에 의심하고 항 감염 및 치료 방법을 정확하게 수행 할 수있게 해주는 많은 특징적인 차이점이 있습니다.

잠복기는 짧으며 15 시간에서 3 일에서 5 일까지 지속되지만 대개는 1-3 일간 지속됩니다.

대부분의 환자는 질병의 첫 번째 날 동안 전체 증상 복합체가 발병 할 때 급성 질환의 발병이 있습니다. 어린 아이들에게는 아 급성 발병이 가능합니다. 증상의 1 일 또는 2 일째에 나타나는 모습과 질병이 2 일에서 3 일 동안 지속되는 것을 특징으로합니다. 로타 바이러스 감염의 가장 특징적인 증상은 위장관 손상으로 60-70 %의 환자가 호흡기 손상 증상의 발생과 병합됩니다. 때로는 카타르 증상이 3-4 일의 장 기능 부전보다 먼저 나타날 수 있습니다. 호흡 증후군은 중등도의 충혈과 인두의 입상, 부드러운 입천장과 구개 연결부, 비강 울혈, 기침을 나타내며 ARVI와는 달리 발음이 덜하고 증가하는 경향이없고 수명이 짧습니다 (4-5 일). 설사는 95-97 %의 환자에서 발생합니다. 로타 바이러스 감염의 경우 위장염이 발생하며 장염이 발생하지 않습니다. 의자는 보통 액체, 물, 거품, 불투명 한 색이며 불순물이 없거나 소량의 점액이 있습니다. 어린 아이들에게는 설사가 우세하여이 연령대에서 퇴행성 빈혈이 더 자주 발생합니다. 발판의 빈도는 하루 평균 4-5 회를 초과하지 않지만, 더 어린 소아에서는 15-20 회에 달할 수 있습니다. 성인 및 노인의 설사 기간은 3 - 7 일이며 유아의 경우 최대 10 - 14 일입니다. 구토는 추기경 증상이며 로타 바이러스 감염 환자의 80 %에서 나타납니다. 대부분 설사와 동시에 발생하거나 설사와 동시에 발생합니다. 구토는 종종 ​​반복되지만 단기 (1-2 일)입니다. 이 감염에 대한 반복적이고 통제 할 수없는 구토는 전형적인 것이 아니며 흔히 혼합 감염을 나타냅니다. 일반적으로 온도는 38.5 - 39 ° C를 초과하지 않으며 질병의 3-4 일에 정상화됩니다. 일반적인 중독의 가장 일반적인 징후는 약점, 혼수, 약점, 두통, 현기증입니다. 질병의 중증도는 I - II 정도, 덜 흔한 III 등급의 발달에 의해 결정되며 이는 유아에서 더 흔합니다. 동시에, 전해질 손실 (Na 및 K)이 적어서 수분 공급 요법을 시행 할 때 고려해야합니다.

4. 진단 및 감별 진단

환자의 객관적인 검사는 혼수, 결막 충혈 및 공막의 혈관 주사를 나타냈다. 적당히 코팅 한 혀, 건조한 것. 복부는 소장의 촉지에 부드럽고 적당히 아프다. 간과 비장은 확대되지 않습니다. 맹인 및 S 상 결장은 부드럽고 통증이 없습니다. 혈압이 감소합니다. 맥박은 혼잡하지 않고 오히려 상대적인 서맥 경향이 있습니다. 수막 현상은 없습니다. 말초 혈액에서 질병의 초기에는 중등도의 백혈구 증가증이 발생할 수 있습니다. 질병의 2 ~ 3 일 사이에 백혈구 찌꺼기의 수가 감소하고 림프구와 단핵 세포 수가 증가하여 백혈구 감소증이 생기는 경향이 있습니다. ESR은 증가하지 않습니다.

실험실 분석 소변에서 약간의 알부민뇨, 빠른 통과 미세 혈뇨, 백혈구 수의 약간의 증가, 유리 실린더의 모양이 가능합니다. 소변의 변화는 질병의 심각성과 탈수에 따른다.

대변의 현미경 검사에서 백혈구의 수는 시야에서 10-15를 초과하지 않으며, 점액이 혼합되어 있습니다.

국소 의사에 의하면, 초점 변화없이 직장 및 S 상 결장 점막의 중등도 충혈을 확인할 수 있습니다.

로타 바이러스 위장염은 설사의 강도와 탈수증에 의해 결정되는 중증도와 일반 중독의 심각도로 나뉩니다. 로타 바이러스 위장염에는 중등도, 중등도, 중증도의 세 등급의 중증도가 있습니다.

감별 진단은 살모넬라 증, 콜레라, 이질, ​​조건부 병원성 미생물에 의한 식 인성 독소 감염, persinosis 및 다른 바이러스 성 위장염으로 수행됩니다.

위장병 형태의 살모넬라증은 품질이 떨어지는 제품을 먹은 사람들의 병이 동시에 나타나는 것을 특징으로합니다. 일반적으로 급성 발병 : 고열, 심한 오한, 구토, 심한 복부 통증, 대변의 성격을 유지하는 풍만한 악취 대변, 백혈구 수식을 왼쪽으로 이동시킨 호중구 백혈구 증. 살모넬라증은 인두의 점막에 변화가 없으며, 간은 일반적으로 커집니다. 대변, 구토 또는 위 세척의 세균 학적 검사에서 병원균의 격리는 진단을 해결합니다.

대량의 임상 증상과 질병의 급속도에 따르면 로타 바이러스 위장염은 콜레라와 비슷할 수 있습니다. 그러나 로타 바이러스 감염은 더 온화한 과정으로 특히 구강 인두의 점막에서 전형적인 변화의 존재뿐만 아니라 알지드의 상태를 발전시키지 않는다는 사실에 의해 구별됩니다.

비브리오 콜레라 (Vibrio cholerae) 검출의 경우 세균 학적 연구의 결과가 가장 중요합니다. 유사한 상황이 NAG 감염과 함께 발생합니다.

세균성 이질은 점액과 혈액이 혼합 된 대변, 일정한 발열 반응, 결장 내시경 검사에서 대장의 말단 부분의 병리학 적 변화 등 급성 복통이 특징입니다. 세균학 연구 결과뿐 아니라 이러한 모든 징후는 이염의 대장염 형태에 대한 감별 진단을 비교적 쉽게 수행합니다. 위장관이 이형성 인 경우 세균 검사 결과의 가치가 극적으로 증가합니다.

이 질병의 임상 적 그림에 대한 충분한 지식이 없기 때문에, 기회 감염 병원균에 의한 로타 바이러스 위장염과 식품 독성 감염의 차별 진단은 특히 어렵습니다. 실험실 연구의 진단 적 중요성에 따르면 환자의 대변에서 조건 적으로 병원성 박테리아를 발견하는 것이 아니라 로타 바이러스 성을 확인하는 바이러스 및 면역 연구의 긍정적 인 결과가 우선되어야한다.

위장관 형태의 periniosis의 경우, 점진적인 발병이 특징이며 위장염과 함께 근육과 관절의 통증이 있습니다. 간은 일반적으로 확대됩니다. 대변은 점액이 풍부하게 혼합되어 점성이 있으며 때로는 피가 가능합니다. 백혈구 증은 혈액에 나타납니다. ESR 증가.

위장염 증후군은 일부 바이러스 성 질환에서 두드러 질 수 있습니다. 이들은 결장염 이외에 결막염, 비염, 인후염, 편도선염, 기관지염, 폐렴, 자궁 경부 림프절의 증가, 간, 비장, 장기간의 열이있는 아데노 바이러스 감염을 포함합니다.

Koksaki 및 ECHO의 엔테로 바이러스에 의한 장염 및 위장염에서 로타 바이러스 위장염은 장 손상이 가장 큰 단 염증 임상 사진을 특징으로합니다. 대조적으로, 엔테로 바이러스 성의 전염병 발생 중에, 뇌, 피부 및 상부 호흡기 막의 손상에 대한 증상이 중요한 역할을 할 수있는 다양한 임상 형태의 질환의 존재, 임상 화상의 "다형성"이 주목된다.

소아에서 대장염으로 인한 로타 바이러스 감염의 차별 진단은 가장 어렵고 다음 기준을 기반으로 할 수 있습니다.

- 특히 장 병원성 대장균증에 의한 대장균증에 비해 로타 바이러스 감염의 급성 발병;

- 어린 아이에서도 로타 바이러스 감염으로부터의 빠른 회복;

- 로타 바이러스 감염의 경우 호흡 증후군의 빈도는 높지만 심각성과 지속 기간은 적습니다.

가장 큰 어려움은 혼합 된 로타 바이러스 - 세균 감염의 진단으로, 겨울 시즌의 비율이 상당히 높습니다 (모든 OKI의 7-10 %).

혼합 감염 클리닉의 특징은 중독 증상의 증가, 소장 및 대장 점막의 염증 변화 징후의 출현 및 느린 회복과 같은 복합 감염의 특징 인 증상 복합체의 존재입니다.

로타 바이러스로 인한 OCI로 의심되는 어린이 및 성인의 입원은 임상 적 (질병의 중증도) 및 역학 징후 (환자의 환경에서의 약한 어린이의 존재, 1 학년 아동, 유치원 아동 기관, 식품 산업 근로자 및 그들과 동등한 사람 집에서의 안티 유행 정권에 따르지 못하는 것 등). 심한 OCI 증상이있는 1 세 미만의 어린이는 먼저 입원합니다. 로타 바이러스 위장염이 의심되는 환자와 다른 원인의 급성 장 감염 (별도의 병동, 상자)의 입원은 의무적입니다. 챔버 (상자)의 "일 회 충전"원칙을 준수해야합니다.

로타 바이러스 위장염 환자의 치료는이 질병의 병인에 관한 기존의 아이디어를 고려하여 장의 기능 상태를 위반하고 해열 성 전해질 균형을 회복시키고 신체 해독을 보전하는 보충 요법과 보상을 포함합니다.

질병의 급성기에는 4-B식이 요법이 시행되며 탄수화물 (최대 200g)의 제한과 칼로리 함유량 (2400 칼로리)의 약간 감소와 함께 단백질 (최대 150g)의 증가가 있습니다. 설탕의 양은 하루 40g, 야채 및 과일로 제한됩니다. 우유는 제외됩니다. 소금은 제한되지 않습니다.

로타 바이러스 위장염 환자의 치료에서 수입 (panzinorm, digestal, festal, trienzyme 등)보다 열등하지 않은 oraz, solizim, somilase와 같은 국내 소화성 다중 효소 제제의 목적이 제시됩니다.

유기체의 탈수의 정도는 반드시 평가되어야하며 치료는 물과 소금의 초과 손실을 보충하기 위해 수행됩니다. V.I.에 따른 탈수증은 I - II 정도이다. 포도당 - 전해질 용액은 체액과 전해질의 손실을 고려하여 Pokrovsky (rehydron glucosolan)에 경구 투여되며, III 등급의 탈수시에는 물 - 염 용액 (trisol, quartosol, chlosol, acesol) 등의 정맥 내 투여로 치료를 시작할 필요가 있습니다.

솔루션 도입의 전술은 수분 공급 요법의 원칙에 따라 수행됩니다.

정상적인 혈액 순환과 해독을 안정화시키기 위해 콜로이드 용액 (gemodez, polyglukin, reopolyglukine)을 넣을 수 있습니다.

부작용이없는 세균 감염이 없다면 항균제 처방이 정당화되지 않는다는 점을 강조해야합니다.

흡착제와 수렴제를 사용하는 것이 좋습니다.

바이러스 감염 치료는 현재 개발되지 않았습니다.

convalescents의 추출물은 대변의 안정화 (2 ~ 3 일 이내) 및 합병증이없는 경우에 기저 질환의 모든 다른 임상 증상의 소실 후에 수행됩니다.

취학 전 교육 기관에 다니는 어린이들, 식품 시설 근로자들, 그들과 동등한 사람들은 임상 증상이 사라진 후 일회성 바이러스 검사를 받게됩니다.

나머지 환자는 의무적 인 검사실 검사를받지 않습니다.

6. 실험실 진단

로타 바이러스 위장염의 검사실 진단은 현재 어렵지 않습니다. 임상 증후군 및 단기 병원 체류의 급속한 발전은 질병의 병인을 결정하기위한 신속한 방법의 사용에 대한 필요성을 요구합니다. 이 설명서에서 권장하는 대부분의 검사실 진단 방법을 사용하면 첫날 로타 바이러스를 탐지 할 수 있습니다. 각 경우의 방법 선택은 실험실의 기술 장비와 적절한 시약의 사용 가능 여부에 따라 결정됩니다.

환자의 혈청에서 혈청 학적 변화를 감지하는 전통적인 방법 (중화 반응, 혈구 응집 억제 및 보체 고정)은 질병의 후 향적 분석에서 중요하다. 따라서, 로타 바이러스 감염의 초기 혈청 진단을 위해서는 IgM 클래스 항체의 측정이 권장됩니다.

병든 사람의 바이러스 연구의 목적은 대개 배설물입니다. 환경에서의 로타 바이러스의 존재 및 분포는 토양, 음식 및 물 (폐수, 자연 및 인공 저수지의 물, 식수)의 샘플을 검사하여 감지합니다.

6.1. 임상 물질에서의 로타 바이러스 검출

환경 샘플

6.1.1. 테스트를위한 샘플 준비; 샘플링

바이러스 연구를 위해 샘플을 채취 할 때, 오염으로부터 물질을 보호하기위한 조치를 취하면서 몇 가지 일반적인 요구 사항이 충족됩니다. 견고한 고무 마개가있는 멸균 식기와 강화 된 점착 석고에서만 시료를 채취합니다. 얼음 또는 냉매가 든 용기에 샘플을 옮기십시오.

6.1.2. 서스펜션 준비, 설명,

샘플 세척, 박테리아 플로라 제거

로타 바이러스에 대한 연구를위한 대변 샘플의 준비에는 10 % 현탁액의 준비, 균질화, 3000 rpm에서의 원심 분리가 포함됩니다. 박테리아의 식물을 제거하기 위해 30 분 안에. 환경 및 식품의 사물을 검사 할 때, 연구 된 물질의 사전 농축이 수행됩니다.

6.1.3. 물 시료 중 바이러스 입자의 농도

로타 바이러스의 농도는 환경의 수역에서의 검출 효율을 높이기위한 중요한 조건입니다.

다공성 실리카 - 거대 다공성 유리 (MPS)에서 흡착 크로마토 그래피를 사용하여 로타 바이러스를 농축하는 방법은 0.1-10 리터의 물을 사용하여 간단하고 편리합니다. 샘플을 MPS 층에 통과 시키면 바이러스가 유리 표면에 흡수됩니다. 바이러스의 탈착을 일으키는 능력을 가진 용액을 사용하여 바이러스의 용출. 바이러스는 소량의 용액으로 유리에서 제거되며 원래 샘플과 비교하여 수십에서 수백 배의 농도가됩니다.

흡착 특성을 향상시키기 위해 MPS-1000 VGH 상표 유리의 국내 준비는 다음과 같이 처리됩니다 : 3 % H2O와 6M HCl의 혼합물 (1 : 1)을 준비합니다. 유리는 혼합물 2 부피에 대해 1 부피의 비율로 준비된 혼합물로 채워진다. 1 시간 동안 흄 후드 (스토퍼없이)로 끓여서 안전 예방 조치를 준수하십시오. 증류수로 중성 pH로 세척한다. 100 ℃에서 건조시킨다.

실리콘 오일로 전처리 한 유리 칼럼 (2 ~ 3cc). 증류수에 담근다. 시험 시료 (3㎕)에 최종 농도 0.05M의 MgCl 용액 1M을 첨가한다. 물을 클립을 사용하여 유속을 조절하여 150-500㎖ / 시간의 속도로 컬럼을 통과시킨다. 칼럼을 통과하여 용출액 10ml : 고기 추출물 3 %, pH 9.0; 또는 트립 토스 인산염 완충액 1 %, pH 9.0; 또는 2M NaCl, pH 11.0을 함유하는 Tris HCl 0.1M (용액은 용출 특성이 감소하는 순서로 기재 됨). 분액을 1ml의 부피로 취하여 분획의 pH를 중성으로한다.

6.2. 전자 현미경 (EM) 및 면역 전자 현미경 (IEM)을 이용한 바이러스 입자의 검출

전형적인 환자의 대변에있는 rotavirus 입자의 함량이 질병의 처음 2 ~ 3 일 동안 높기 때문에, EM 방법은 배설물을 추가로 농축시키지 않고 로타 바이러스 입자를 검출하는 데 사용할 수있는 로타 바이러스를 탐지하는데 널리 사용됩니다.

약물 준비를 위해, 조사 된 10 % 현탁액 한 방울을 치아 왁스 또는 왁스 종이의 판에 적용합니다. 필름 - 기판의 한 방울 아래에 전자 현미경 그리드가 붙어있다. 1 ~ 3 분 후 그리드를 한 방울의 증류수와 대조 용액 (1 NKOH로 pH 6.5-6.6으로 조정 한 2 % 인산 나트륨 용액)에서 씻어 낸다. 그 초과분은 30-40 초 후에한다. 여과지를 제거하면 메쉬가 건조됩니다. 조제의 관찰은 30 내지 50000 배의 장치 배율을 갖는 전자 현미경으로 수행된다.

로타 바이러스는 특징적인 크기와 바이러스 성 입자 형태의 배설물 현탁액에 대한 EM 검사로 쉽게 검출됩니다. 로타 바이러스는 분변 물질에서 발견되는 다양한 바이러스 입자 및 바이러스 유사 체, 박테리오파지 입자 및 세균 편모와 구별되어야한다.

IEM 기술의 사용은 경우에 따라 로타 바이러스 검출 비율을 높이는 것뿐만 아니라 병인학적인 역할을 증명할 수 있습니다. IEM 연구에서는 1 : 5 희석 면역 혈청 0.1ml를 10 % 분변 추출물 0.4ml와 혼합한다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안,이어서 4 ℃에서 12 시간 동안 배양 한 후, 90 분 동안 원심 분리한다. 15,000 rpm으로 상층 액을 배출하고 생성 된 침전물을 몇 방울의 증류수에 재현 탁하여 포스 포로 텅스텐 산 (pH 6.5)의 2 % 용액과 대조하여 목적 그리드 위에 놓는다. 과도한 수분이 여과지로 제거됩니다. 마약 연구는 전자 현미경을 사용하여 50000x의 기기 배율로 수행하여 대상 그리드의 최소 5 개의 세포를 관찰합니다. 양성 결과의 경우, 로터 바이러스 입자는 특정 클러스터 (면역 복합체)의 형태로 조제 물에서 검출됩니다.

6.3. 시험 물질에서 로타 바이러스 항원의 검출

6.3.1. 면역 반응물 얻기

과 면역 혈청 및 특정 로타 바이러스 면역 글로불린은 토끼, 기니아 피그, 닭의 면역화에 의해 얻어진다.

면역화를위한 항원은 다음과 같이 준비되었다 : 로타 바이러스 SA-II의 배양 현탁액 5 ㎖를 트립신으로 처리하고 37 ℃에서 60 분 동안 배양 한 녹색 원숭이 신장 4647의 이형성 세포의 단층을 갖는 1.5 리터 매트리스 플라스크에 첨가 하였다; 무 혈청 유지 배지를 첨가하고 37 ℃에서 24 내지 48 시간 동안 배양한다. 모든 바이오 매스를 3 배 냉동 또는 초음파 처리 한 후 PEG M 6000을 8-10 % 농도로 첨가하고 4 ℃에서 20 시간 동안 방치 한 다음 10,000 rpm으로 원심 분리한다. 2 시간 펠렛을 PBS에 재현 탁한다 (바이오 매스 체적의 1/30 - 1/50). 프레온 113으로 세척 한 후, 수성 상을 사용하여 동물을 면역화시키고 면역 학적 연구에서 항원으로 사용한다. 1ml의 농축액에는 적어도 10 개의 바이러스 성 입자가 들어 있습니다.

토끼의 예방 접종 : 토끼에게 1 일, 7 일, 35 일, 42 일에 2 ml의 로타 바이러스 제제를 정맥 주사하고, 예방 접종 후 49 일째에 혈액을 채취합니다. 1 일 및 35 일에, 항원에 후방의 여러 지점에서 추가의 Freund 's complete adjuvant를 주사합니다.

면역 글로블린 분획은 6000의 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)의 10 % 수용액으로과 면역 토끼 세럼으로부터 침전된다. 침전물을 원심 분리에 의해 수집하고 용해시키고 0.01 M K- 인산 완충액 (pH-7.4)에 대해 0:01 M Nace FSB). 면역 글로불린의 농도를 분광 광도계로 측정 하였다.

기니아 피그의 예방 접종 : 동물에게 마지막 면역 접종 후 2 주 후에 혈액 샘플링 인 1.14 및 28 일에 동일한 양의 프로 인트 완전 보조제를 포함한 농축 로타 바이러스 제제 0.5ml를 근육 내 주사합니다.

닭의 예방 접종 : 20 주 된 백색 Leghorn Zarya-17 품종 교잡종의 닭은 1, 14, 28 일에 정맥 내로 면역화됩니다. 첫 번째 면역화 동안, 항원은 동일한 부피의 프로 인트 완전 보조제와 함께 혼합물에 추가로 근육 내 투여된다. 3 번째 면역 후 노른자에서 항체의 최대 양이 관찰됩니다. 닭은 재 접종 후 영구적으로 사용할 수 있습니다.

닭 면역 글로블린의 분리 : 노른자는 껍질이나 부크 너 깔대기의 단백질에서 분리되어 수돗물로 씻어 낸다. 노른자 (10 ml)를 원심 분리 관으로 옮기고, FSB의 2 배 부피 (20 ml)를 넣고 잘 섞는다. PEG 6000을 3.5 % (w / v)의 농도로 가하고 10 분 동안 혼합 하였다. 14000 g에서. 상청액을 여과지를 통해 눈금이 매겨진 원통형으로 여과한다. PEG 6000을 최종 농도 12 %로 추가하여 혼합합니다. 침전 된 면역 글로불린을 원심 분리 (10 분, 14,000 회)로 수집한다. 침전물을 5ml의 FSB (1/2 부피의 난황)에 용해시킨다. 제제 중의 단백질 농도는 대개 6 - 12 mg / ml입니다.

6.3.2. 효소 면역법 (ELISA)의 방법

효소 면역 측정법 (ELISA)은 효소 분자 (퍼 옥시 다제)로 표지 된 항체를 사용하여 바이러스 항원을 검출하는 가장 일반적이며 효과적이고 구체적인 방법 중 하나입니다. 일반적으로 직접 및 간접 "샌드위치"옵션을 사용합니다. 효소 마커는 기질과의 색상 반응에서 검출됩니다. 직접 ELISA 변형은 간접 ELISA 변형보다 빠르지 만 덜 민감하고 특이 적입니다. 간접 변이체의 제형에서, 면역 글로불린과 효소와의 항 - 특이 적 상용 접합체가 사용된다; 접합체와 패널에 흡착 된 항체 사이의 비특이적 상호 작용을 방지하기 위해 두 가지 다른 동물 종의 항 바이러스 혈청이 필요합니다.

간접 ELISA 변이 : 웰의 반 (48 개)에서 면역화 된 닭의 알의 노른자로부터 0.1 ml의 안티 - 트롬 툰 면역 글로불린을 웰에 주입한다. 나머지 절반에서는 면역 전에 놓인 난에서 면역 글로블린을 음성 대조군으로 도입합니다. 면역 글로불린의 흡착은 4 ℃에서 밤새 5 μg / ml의 농도를 갖는 용액으로부터 수행된다. 웰의 내용물을 배수시키고, 웰을 PBS-T로 세척하고, 0.1 ㎖의 시험 샘플을 1 % BSA 및 0.01 M EDTA가 함유 된 PBS-T 중에서 항 - 트로 타 바이러스 및 정상 면역 글로불린을 갖는 웰에 가하고, 37 ℃에서 1 시간 동안 인큐베이션 하였다.

세척 후, 1 : 1000 - 1 : 25000으로 희석 한 토끼 항 - 로타 바이러스 혈청 0.1ml를 PBS-T 완충액 중의 웰에 첨가한다. 최적의 혈청 희석은 사전 설정된 실험에서 결정됩니다. 패널을 닫고 2 시간 동안 37 ℃에서 인큐베이션 하였다. 웰을 세척하고, PBSB-T-BSA 중의 퍼 옥시다아제 함량으로 1 내지 2.5㎍ / ml 농도의 토끼 IgG에 대한 퍼 옥시다아제 표지 된 항체의 시판 제제 0.1ml를 첨가하고, 37 ℃에서 1 시간 동안 항온 처리한다. 웰을 씻은 다음 새로 제조 한 기질 혼합물 (0.05M Na- 시트 레이트 완충액 pH 5.0, HO - 0.03 % 중 O- 페닐 렌 - 디아민 0.5mg / ml) 0.1ml를가한다. (주의! 주의)!) 어두운 곳에서 실온에서 30-40 분 동안 품어 둔다. 효소 반응은 0.05M의 3M H2O를 첨가하여 중단한다. 반응 결과는 시각적으로나 분광 광도계에서 고려됩니다. 샘플은 양성으로 간주되며, 이의 광학 밀도는 음성 대조군의 광학 밀도의 2 배 이상이다.

6.3.3. 응집 방법

이 방법은 Cowan 균주의 Staphylococcus aureus가 IgG의 Fc 단편과 결합하는 능력에 기반하고 특정 항원 - 항체 복합체의 형성 중에 응집 현상을 일으킨다.

응집 반응의 형성을 위해, 0.1 % 메틸렌 블루 용액에서 사용하기 전에 단백질 A (파스퇴르 전기 화학 의학 연구소, 레닌 그라드)를 함유하는 시판용 건조 포도상 구균 시약을 사용한다.

이전에는 각 시리즈의 과민 혈청을 스 테르 필로 코커 클 항체의 존재 여부를 테스트했습니다. 이렇게하려면 유리 슬라이드에 1 : 500의 희석과 포도상 구균의 10 % 현탁액으로 같은 부피의 혈청을 섞으십시오. 교육 응집 5 분 이내에 결과를 고려하십시오. 1 : 500의 희석으로 항 스타 필로 코커스 항체를 함유하지 않는 선택된 혈청의 연구. 검체의 준비를 위해 FSB로 1:10으로 희석 한 항 랫트 바이러스 혈청 0.01ml를 포도상 구균의 10 % 현탁액 0.5ml와 혼합하고 실온에서 1 시간 동안 방치 한 다음 9.5ml의 FSB (검체)를 첨가한다. 같은 방법으로, 포도상 구균은 전 면역 혈청 (대조 시약)에 민감합니다. Diagnosticum과 control reagent는 PKA와 TRKA의 반응에 사용됩니다.

패널의 U 자 모양의 우물에서 RCA를 스테이징하기 위해 0.05 ml의 PBS pH 7.4를 만든다. 두 개의 우물에서 Takacchi microtitre 또는 dispenser 0.05 ml의 대변 10 % 부유물을 만들고 1 : 2 - 1 : 256의 연속 2 배 희석액을 준비하십시오. 첫 번째 행의 우물에 0.05 ㎖의 검체를 첨가하고, 두 번째 줄의 우물에는 0.05 ㎖의 대조군 시약을 첨가한다. 패널을 뚜껑으로 덮고 서모 스탯에서 37 ° C - 3 시간 동안 배양한다. 각 실험에서, 로타 바이러스 SA-II에 감염된 세포의 용해 액뿐만 아니라 로타 바이러스에 대해 양성 및 음성 인 배설물 샘플을 전자 현미경으로 일찍 시험 하였다.

반응 고려 : 대조군 시약과 병행하여 역가와 함께 네거티브 결과 또는 4 배 감소와 함께 응집체 "우산"이 진단 표식과 함께 검출 될 때 그 결과는 양성으로 간주된다. 디스크가 두 개의 병렬 행에 형성되면 결과는 음수로 간주됩니다. 쌍을 이룬 줄에서 비특이적 인 응집을 제거하기 위해 배설물 현탁액을 같은 양의 정상 토끼 혈청으로 37 ℃에서 2 시간 흡착시킨 다음 80 ℃에서 45 분간 가열합니다. 그런 다음 응집 반응의 반응을 다시 경험하십시오.

6.3.4. 응집 응집 (TRKA)의 고상 반응 방법

로타 바이러스 항원을 검출하는이 방법은 고체상 면역 측정법 (4.3.2 항 참조)의 원리에 기초합니다. 그러나 후자와 달리 TRCA는 효소를 라벨로 사용하지 않고 검 사약과 대조 시약 (4.3.3 참조)을 사용합니다.

병기 결정을 위해 TRKA는 U 자 모양의 우물을 가진 면역 패널을 사용합니다. 민감화를 위해 0.01M 탄산 중탄산 완충액 (pH 9.6) 1 : 1000으로 희석 한 과민 면역 세럼 0.1 ㎖를 웰에 첨가한다. 혈청 패널은 37 ℃에서 2 내지 3 시간 동안 방치된다. 고체상 항체에 결합되지 않은 항체는 3 분 동안 3 회 세척하여 제거한다. FSBT. 그 후, 0.05ml의 시험 물질과 웰에서 명백하게 양성 및 음성의 시료 (각 시료 당 2 개의 웰)를 37 ℃에서 2 시간 동안 방치하여 항원 - 항체 복합체를 형성한다. 결합되지 않은 항원 및 관련 불순물은 PBS의 트리플 세탁에 의해 제거된다. 그런 다음 1 개의 우물에 0.05 %의 포도상 구균 검체를 첨가하고, 2 번째 (대조군) 포도상 구균의 0.5 % 현탁액 0.05ml를 전 면역 혈청에 감작시켰다 (4.4.3 참조). 배양은 37 ℃에서 1 내지 2 시간 동안 수행 한 후, 4 ℃에서 1 내지 3 시간 동안 또는 4 ℃에서 18 내지 24 시간 동안 두었다. 응집 반응의 결과는 시각적으로 고려됩니다 : 긍정적 인 반응으로, 응집 된 박테리아는 우산을 형성합니다; 부정적인 반응으로 박테리아는 완전히 디스크 형태로 안정화됩니다.

6.3.5. 간접 혈구 응집의 방법

이 방법에서, 로타 바이러스 항원의 검출은 적혈구 SA-II로 면역화 된 흰쥐의 면역 글로불린 복수 액에 의해 민감화 된 양 적혈구 인 적혈구 항체 검체의 사용에 기초한다.

패널 웰에서 10 % 배설물 현탁액의 2 배 희석액을 적혈구 진단액으로 검사한다. 적혈구 검체의 응집은 표본에서 로타 바이러스 항원의 존재를 나타냅니다. PHA의 제형에 대한 자세한 설명은 준비 키트 (과학 생산 협회 "Rostepidkompleks", Rostov-on-Don)에 첨부 된 지침서에 나와 있습니다.

Rotatest 키트는 역방향 수동 혈구 응집을 기본으로하며 대변에서 로타 바이러스를 검출하고 혈청에서 로타 바이러스에 대한 항체를 검출하도록 설계되었습니다.

6.3.6. 로타 바이러스의 면역 세포 화학적 검출 방법

상기 방법은 바이러스 - 함유 물질로 감염된 결과 세포에서 합성 된 바이러스 항원의 면역 화학적 인 결정에 기초한다.

ELISA와 비교하여이 방법의 장점은 시험 샘플의 감염성을 결정하고 정량화 할 수있는 능력뿐만 아니라 높은 감도에있다.

실험의 스테이징 : 3-10 세포 / ml의 농도로 녹색 원숭이 신장의 이식 된 세포를 평평한 바닥 패널의 웰에 넣고 37 ℃에서 배양합니다 (24 ~ 48 시간). 이어서 세포를 Eagle-MEM 배지로 세척한다. 시험 물질을 Eagle-MEM 배지로 희석시키고, 10 μg / ml 트립신의 존재하에 37 ℃에서 1 시간 동안 활성화시키고 적어도 4 개의 웰에서 0.1 ml로 첨가한다. 양성 대조군은 로타 바이러스가 포함 된 것으로 알려진 물질이 삽입 된 우물입니다. 음성 대조군 : 감염되지 않은 세포와 우물을 가진 우물. 시험과 비슷한 물질이 도입되지만 로타 바이러스는 함유하지 않음. 흡착을 37 ° C에서 1 시간 동안 수행 한 다음 배지를 제거하고 세포를 Eagle-MEM 배지로 씻어 낸다. 웰에 trypsin 1 μg / ml 이글 MEM 배지 0.2 ML을 추가하고 37에서 48 시간 품어 ° C.

세포를 식염수로 두 번 씻고 차가운 (-20 °) 85 % 아세톤으로 고정하고 -20 °에서 2 시간 동안 배양 한 다음 아세톤을 제거합니다. 패널을 0.05 % Tween 20을 함유하는 PBS (PBS-T)로 3 회 세척 하였다. PBS-T 면역 광물계 항 - 로타 바이러스 혈청에서 0.1 : 1로 희석 한 1 : 1000을 웰에 첨가 하였다. 37 ° C에서 2 시간 동안 품어 낸다. 패널을 세척 한 후, 1 % BSA를 함유 한 PBS 중의 퍼 옥시다아제 함량으로 퍼 옥시 다제 표지 된 항 -IgG 토끼 항체 (시판 제제) 0.1 ㎖를 웰의 웰에 2 ㎍ / ml의 농도로 첨가하고, 37 ℃에서 1.5 시간 동안 배양한다 C.

패널을 PBS-T로 2 회, 0.05M 아세테이트 완충액 (pH 5.0)으로 1 회 세척한다. 아세톤 0.5ml 및 33 % 과산화수소 0.01ml에 용해 된 아세테이트 완충액 / 4mg의 3- 아미노 -9- 에틸 카르 바졸 (AEC)을 함유하는 퍼 옥시 다제 기질의 새로 제조 된 용액 0.1ml를 웰에 첨가한다. (주의! AEC 작업은주의가 필요함). 30-40 분 동안 품어 낸다. 실온에서 어둠 속에서 패널을 증류수로 세척하여 반응을 정지시킨다.

반응에 대한 설명은 작은 배율의 광학 현미경으로 수행된다. 음성 대조구에는 염색 된 세포가 없어야합니다. 염색 된 세포의 국부적 인 군집은 바이러스 감염의 초점이다.

6.3.7. 면역 형광법

Immunofluorescence를 사용하여 로타 바이러스 항원을 확인하기 위해 세포주 4647을 사용하고, 세포를 페니실린 바이알이나 튜브에 싸인 coverslips 또는 슬라이드에서 재배합니다. 감염된 배양 물을 37 ℃에서 24 시간에서 48 시간 동안 배양 한 후, 유리를 유리 병에서 꺼내어 pH 7.2의 인산염 완충액을 가한 0.15M 식염수로 세척하고 증류수로 헹구고 공기 중에서 건조시킨다. 이어서, 4 ℃로 냉각 된 화학적으로 순수한 아세톤의 2 회 교대 (각각 10 분)로 상기 제제를 고정시켰다.

조제 물은 습기가 많은 챔버에서 간접적 인 방법으로 처리됩니다. 면역 rotavirus 토끼 혈청 한 방울은 문화 세포에 적용하고 30 분 동안 incubated. 37 ° C에서 약물을 FSB에서 세 번 씻고 과도한 수분을 제거합니다. 습식 조제 물은 로다 민으로 표지 된 동량의 항 -FITC- 접합체 및 소 알부민의 혼합물로 염색하고, 30 분 동안 배양한다. 37 ℃에서 FSB에서 3 번 세척 한 후, 혼합물을 공기 중에서 건조시킨다. 비특이적 인 형광을 없애기 위해, 항 바이러스 성 혈청을 사용 전에 정상 세포 배양 균질 액으로 흡착시키고, 표준 방법에 따라 FITC 접합체를 활성탄으로 처리한다.

다음 컨트롤은 필수 컨트롤로 사용됩니다 : 비슷한 방식으로 처리 된 감염되지 않은 배양의 준비 및 로타 바이러스 면역 혈청과 동일한 종의 정상 및 이종 항 바이러스 혈청의 첫 번째 단계에서 처리 된 감염 배양의 준비.

양성 결과의 경우, 뚜렷한 밝은 녹색 형광이 세포의 세포질에서 관찰됩니다.

6.4. 로타 바이러스의 전기 영동 타이핑 방법

이 방법은 바이러스 성 게놈 RNA 부분의 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동을 이용한 로타 바이러스의 동정에 기반을두고 있습니다. 이 방법은 여러 균주의 개별 RNA 단편의 전기 영동 이동성의 차이에 기초하여 로타 바이러스 균주의 분화를 허용하므로 역학 연구에 널리 사용됩니다. 이 방법은 분리 균의 전 배양을 필요로하지 않으며, 높은 감도와 절대 특이성을 갖는다.

이 방법은 로타 바이러스 감염의 집단 발병에 대한 전염병 연구에 특히 중요합니다.

전기 영동 장치를 갖춘 실험실 기준으로 수행 할 수 있습니다.

분석을 위해, 10 - 20 % 분변 현탁액 0.2 - 0.5 ml로 충분하다. 현탁액을 프레온 113으로 처리하고 도데 실 황산나트륨 (1 %) 및 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 나트륨 (0.001M)의 존재하에 프로 나제 ​​(0.2 mg / ml, 15 분)와 함께 배양한다. 아세트산 나트륨 (0.3M)을 첨가 한 후, RNA를 페놀 : 클로로포름 - 이소 아밀 알코올의 혼합물로 탈 단백질시키고 2.5 배량의 에탄올로 침전시킨다 (-20 ℃에서 18 시간 또는 -70 ℃에서 2 시간). 침전물을 원심 분리에 의해 수집하고, 물에 용해시키고 해리 완충액을 첨가한다. 전기 영동은 10 % 겔의 플레이트에서 Laemmli의 방법에 따라 수행된다. 질산은 (0.011 M)은 일반적으로 젤에서 RNA를 염색하는 데 사용됩니다. 젤에서 증상이 나타나면 로타 바이러스 게놈 세그먼트에 해당하는 11 개의 RNA 밴드가 보입니다.

6.5. 혈청 내 클래스 M 면역 글로불린의 측정

고상법에 의한 로타 바이러스 감염 환자

응집 반응 (TRCA)

이 경우, 고체상 응집 반응의 원리 (4.3.4 참조)를 수정에 사용한다 : 패널 웰의 민감화를 위해, 1 : 1000의 희석으로 인간 IgM에 대한 상업 양고기 단일 특이 적 혈청 0.1ml를 사용한다. 패널을 37 ℃에서 2 내지 4 시간 동안 배양한다. 이어서, 웰을 FSBT로 세척하고 3 % 젤라틴 용액으로 채우고 37 ℃에서 30 분간 방치한다. 우물은 FSBT를 씻어서 연구 된 0.05 ml를 만들고 의도적으로 양성 및 음성 혈청을 희석하여 1 : 100 FSBT (각 혈청에 대해 2 개의 구멍)로 희석 하였다. 항체가를 측정 할 때, 시험 된 시료의 이중 희석 물을 검사합니다 (1:10 - 1 : 1280). 패널을 37 ° C에서 2 시간 동안 항온 배양하고, 세척 후, 0.05 ㎖의 검체 및 대조군 시약을 짝을 이룬 웰에 도입한다. 반응은 1-2 시간 후에 고려된다 (상기 4.3.4 참조).

TRCA에 의해 변형 된 동일한 원리를 사용하여 로타 바이러스 감염에 대한 IgA 및 IgG 항체를 시험하고 락토 글로불린에 대한 초유 및 우유의 분석에도 사용합니다.

환자의 혈청에서 M 류 면역 글로불린을 측정하는 방법은 증상이없는 형태의 로타 바이러스 감염으로 인한 명백한 증후의 조기 진단과 감별 진단에 사용됩니다.

7. 전염병 방지 대책

로타 바이러스에 의한 급성 장 감염, 특히 1 학년 아동 및 유치원에 다니는 어린이들은 유행병 예방 조치를시기 적절하게 시행하기위한 목적으로 전염 경로의 원인, 주요 방법 및 요인을 확인하기 위해주의 깊은 역학적 분석이 필요합니다 발발에서.

감염원을 밝히고 중화시키는 조치. 질병에 의심스러운 환자를 찾아내는 것은 외래 방문, 가정 방문, 기관, 병원 등의 어린이 건강 진단에서 모든 보건 기관의 의사가 수행합니다. 확인 된 환자는 어린이 그룹에서 격리됩니다. 환자의 의학적 관찰 및 치료는 집이나 병원에서 수행 할 수 있습니다. 병원에서 퇴원 한 아동 기관에 다니는 어린이 또는 실험실 검사를 통해 가정 방문 치료를 마친 어린이는 소아과 의사의 진단서를 근거로 어린이 그룹에 입원합니다. WG를 가지고 있고 감염의 임상 적 증상이없는 대변으로 로타 바이러스 (또는 로타 바이러스 항원)를 계속 배출하는 어린이는 유치원 - 유치원의 유치원 그룹에 입원 할 수 있으며 지속적인 의료 관찰 및 2 - 3 주 내에 반복적 인 검사를받을 수 있습니다 질병 또는 바이러스 격리의 시작에서.

FG 환자의 가족 초점에 대한 역학 검사는 2 세 미만의 소아의 질병 및 선발 된 소아마비의 수의 성인으로 수행됩니다. 역학 전문의는 비 박테리아 성 위장염이 반복되는 경우 설문 조사를 통해 아동 기관에갑니다.

환자와 의사 소통하는 아동의 의학 관찰은 마지막 아픈 사람의 격리 일로부터 5 일 이내에 수행됩니다.

가족 및 조직 된 집단 모두에서 환자와 의사 소통 한 소아 및 성인의 로타 바이러스 (항원)에 대한 실험실 테스트는 증상이있는 경우 감염된 사람과 역학자의 지시에 따라 수행됩니다 (비슷한 클리닉을 가진 OKI의 반복적 인 질병 OKI의 어린이 팀). 위생 및 위생 체제의 중대한 위반, 식품 기업 근로자 및 그와 동등한 인원의 출현 등). 의무적 인 검사실 검사는 생후 첫해에 아픈 아이의 어머니에게 달려 있습니다. 대변에서 로타 바이러스 (항원)가 발견되는 사람은 전염병 전문의에 의해 철저한 임상 검사를 받아야합니다. 질병의 임상 증상이 없으면 팀의 어린이와 직원이 격리되지 않습니다.

식품 기업 종업원, 수도업 등 재검사 검사 및 의료 감독시에 시설 내에서 고용됩니다. 대변으로 로타 바이러스 (항원)를 배설하는 사람에 대한 반복적 인 실험실 검사는 포괄적 인 검사실 검사를 사용하여 5-7 일 간격으로 감염 학자 및 역학 전문의 처방에 따라 수행됩니다.

아동 기관에서 집단 병이 발생하면 마지막 환자가 격리 된 날로부터 5 일 이내에 격리 조치가 수행됩니다.

기관들은 정기적으로 로타 바이러스 감염을 예방하기위한 위생적이고 교육적인 작업을 수행합니다.

감염의 전염 기제를 깨뜨리는 것을 목표로 한 조치.

연구 결과 15 분 후에 + 70 ° C에서 로타 바이러스에 해를 끼치는 영향이 나타났습니다. 자외선에 노출되면 로타 바이러스도 15 분 후에 비활성화됩니다.

광범위하게 사용되는 소독제의 작용에 대한 저항성 측면에서 로타 바이러스는 엔테로 바이러스 및 A 형 간염과 가깝습니다. 따라서 로타 바이러스 감염 센터와 환자가있는 병원에서는 바이러스 성 간염에 권장되는 방법을 사용하고 요법에 따라 소독 조치를 취하는 것이 좋습니다 A 및 엔테로 바이러스 감염 (부록 N 4, 보건 복지부 명령 N 752의 07/08/81 및 소련 보건부 명령의 08/04/83). 젖꼭지, 장난감, 요리 및 환자 치료를위한 기타 품목은 물론 어린이를 돌보는 사람들의 손을 적절하게 다루는 데 특별한주의를 기울여야합니다.

정기적 인 자외선 조사가 권장됩니다. 자외선 방사는 일반적으로 30 입방 미터의 조사 장치 (OBN-150)를 사용하여 수행됩니다. m 방, OBP-300 60 cu. m 방 및 다른 사람. 차폐되지 않은 피드는 1 cu 당 1 - 1.5 W의 비율로 설정됩니다. 사람들이없는 m 개의 방 (점액 성 눈의 손상을 피하기 위해)은 1 cu 당 2 - 2.5 W의 비율로 차폐되어 있습니다. m의 경우, 사람들의 면전에서 조사가 수행 될 수있다. 소독 시간 - 30 - 40 분. 방의 청소, 침구 린넨 교체 및 분진 에어로졸 형성과 관련된 다른 작업 후에 공기를 조사해야합니다.

병원의 전문 부서에서는 직원이 호흡 마스크를 착용해야합니다.

로타 바이러스 감염을 예방하기위한 위생 및 위생 조치의 조직은 병원균의 전염과 관련된 구강 내 기생충에 대한 현재의 지침 및 기타 감염에 대한 권고에 따라 수행됩니다.

신생아의 로타 바이러스 감염을 예방하는 효과적인 방법 중 하나는 모유 수유입니다.

로타 바이러스 감염의 특정 예방은 수행되지 않습니다.